I metodi o test alternativi alla sperimentazione animale sono definiti con una delle “Tre R”: Replacement (sostituzione) di un test condotto su animali con un test condotto senza l’impiego di animali; Refinement (perfezionamento) di un test su animali per ridurre o eliminare lo stress o la sofferenza dell’animale;  Reduction (riduzione) del numero di animali necessari ad un test.
I metodi alternativi devono essere validati dal Centro Europeo di Convalida dei Metodi Alternativi (ECVAM)  in modo da confermare la loro affidabilità e pertinenza per una determinata valutazione.
Una volta validati scientificamente, i metodi alternativi devono poi essere ufficialmente accettati dagli organi di controllo regolatori dell’Unione europea ed applicati in tutti i settori industriali devono vengono testate le sostanze chimiche per valutarne la sicurezza.